La réaction en chaîne par polymérase (PCR) est l'une des méthodes les plus connues dans les laboratoires des sciences de la vie.
Les plaques PCR sont fabriquées en plastique de première qualité pour une excellente manipulation et analyse des échantillons ou des résultats collectés.
Ils ont des parois minces et uniformes qui assurent un transfert de chaleur précis.
En vue de l'application en temps réel, de minuscules fractions d'ADN ou d'ARN sont isolées et stockées dans des plaques PCR.
Les plaques PCR sont très efficaces pour le thermoscellage et limitent également le flux de chaleur.
Cependant, comme les plaques PCR sont efficaces et fiables, elles sont sujettes aux erreurs et aux inexactitudes lors du traitement des échantillons.
Donc, si vous souhaitez obtenir des plaques PCR de bonne qualité. Il est préférable de contacter un fabricant de plaques PCR fiable. Avec cela, vous pouvez être sûr d'obtenir le meilleur prix.
Vous trouverez ci-dessous quelques précautions pour éviter la contamination des réactifs ou des échantillons et pour éviter des résultats inexacts.
Désinfecter l'environnement
Des résultats positifs ou négatifs incorrects dus à la présence d'impuretés peuvent vous faire douter des résultats.
Les impuretés et les contaminants se présentent sous diverses formes, telles que l'ADN non apparenté ou des additifs chimiques, qui réduisent finalement l'efficacité et l'efficacité de la réaction.
Il existe de nombreuses façons de réduire considérablement le taux de contamination des plaques PCR.
L'utilisation de pointes à filtre stérilisées est un autre moyen utile d'empêcher les impuretés de pénétrer dans l'échantillon par la pipette.
Un ensemble d'équipements entièrement propres, comprenant des pipettes et des portoirs, est fourni spécifiquement pour une utilisation PCR. Cela garantira un transfert négligeable d'impuretés ou de contaminants autour du laboratoire.
Utilisez de l'eau de Javel, de l'éthanol sur les pipettes, les portoirs et les paillasses pour essuyer la contamination.
Allouer un espace réservé pour toutes les réactions PCR afin de réduire davantage la contamination par les particules.
Utilisez des gants propres à chaque étape et changez-les fréquemment.
Plaque PCR
Vérifiez la concentration et la pureté du modèle.
La propreté des paillasses et des équipements utilisés pour analyser les échantillons par PCR doit être maintenue. Il est essentiel de vérifier la pureté des échantillons avant l'analyse et le traitement.
En règle générale, l'analyseur prend en compte la concentration et le niveau de pureté de l'échantillon d'ADN.
Le rapport d'absorbance de 260 nm/280 nm ne doit pas être inférieur à 1,8. Les impuretés ont ensuite été identifiées à l'aide de longueurs d'onde comprises entre 230 nm et 320 nm.
Dans un exemple, des sels chaotropiques et d'autres composés organiques ont été détectés à une absorbance de 230 nm. Détectez et vérifiez simultanément la turbidité dans les échantillons d'ADN à l'absorbance à 320 nm.
Éviter de surcharger les plaques et produits PCR
Bien qu'il soit souhaitable d'exécuter plusieurs produits en même temps, cela peut entraîner une contamination croisée des plaques PCR.
La surcharge des plaques PCR avec différents produits est un gaspillage et rend difficile l'identification des échantillons.
Tenir des registres des aliquotes de réactifs PCR
Des cycles continus de congélation/décongélation et l'utilisation fréquente d'aliquotes peuvent endommager les réactifs de PCR, les enzymes et les DNTP par recristallisation.
Efforcez-vous toujours de surveiller le taux d'aliquotes utilisées lors de la préparation des échantillons pour l'analyse.
Le LIMS préféré est plus adapté pour contrôler les stocks et les quantités de réactifs et d'échantillons à congeler ou à décongeler.
Choisissez la température de recuit optimale.
Choisir et utiliser la mauvaise température de recuit est une autre façon dont les résultats de PCR contiennent des erreurs.
Parfois, la réponse ne se passe pas comme prévu. La température de recuit doit être abaissée pour favoriser une réaction réussie.
Cependant, l'abaissement de la température augmente le risque de faux positifs et de dimères d'amorces.
Lors de l'utilisation de plaques PCR, il est important de confirmer l'analyse de la courbe de fusion car c'est un bon indicateur pour choisir la bonne température de recuit.
Le logiciel de conception d'amorces facilite la conception, fournissant la température de recuit correcte, réduisant directement les erreurs dans les plaques PCR.
plaque pcr
