Application du flacon de sérum
La bouteille de sérum est en verre borosilicaté à faible extraction et la bouteille transparente incolore répond aux exigences des normes USP Type I et ASTM E 438 Type I Standard Classe A. Elle peut être autoclavée à 121 degrés pendant 20 minutes et peut être divisée en 125 ml. , 250ml, 500ml, 1L, 2L selon le volume.
La bouteille de sérum est un récipient pour stocker le sérum, qui est généralement fabriqué en matériau PET par un procédé de soufflage par injection et étirage. Le milieu est le nutriment nécessaire à la croissance cellulaire. Selon sa source, il est divisé en milieu synthétique et milieu naturel, qui peuvent tous deux être stockés dans des flacons de sérum.
Flacon de sérum
Milieu naturel :
Le milieu naturel le plus couramment utilisé est le sérum, essentiellement le sérum de veau. Le sérum contient une variété de facteurs de croissance cellulaire, de facteurs favorisant l'adhésion et leurs substances multi-actives. Combinées à un milieu synthétique, les cellules peuvent proliférer et se développer en douceur. Le sérum doit être stocké dans des flacons de sérum spéciaux à -5 degré à -20 degré .
Milieu synthétique :
Le milieu synthétique est strictement formulé en fonction du type et de la quantité de substances requises par les cellules. Il existe de nombreux types et composants connus, ce qui facilite le contrôle des conditions expérimentales. Contient des glucides, des acides aminés, des lipides, des sels inorganiques, des vitamines, des oligo-éléments et des facteurs de croissance cellulaire. Cependant, par rapport au milieu naturel, certains composants naturels inconnus ne peuvent pas être remplacés par des composants chimiques connus. Par conséquent, le milieu synthétique de base utilisé en culture cellulaire doit également ajouter une certaine quantité de composants du milieu naturel pour venir à bout de la culture synthétique. Base insuffisante, la pratique la plus courante consiste à ajouter du sérum de veau.
La forme de la bouteille de sérum est carrée, facile à saisir, résistante à la plupart des corrosions acides et alcalines, la température de fragilisation est de -70 degré et elle a toujours une certaine ténacité à -30 degré. C'est un bon contenant de conditionnement, qu'il s'agisse de milieu naturel ou de culture synthétique. peut être stocké dans des flacons de sérum.
Pour l'isolement, la culture et l'identification des cellules progénitrices endothéliales du sang de cordon ombilical humain et l'établissement d'échafaudages vasculaires acellulaires par une méthode améliorée de congélation-décongélation
Explorer la faisabilité et la valeur de l'application clinique des cellules progénitrices endothéliales isolées et cultivées à partir de sang de cordon ombilical humain.
Méthodes : Le sang du cordon ombilical des fœtus subissant une césarienne à terme au Département d'obstétrique et de gynécologie du premier hôpital affilié du Collège médical de Bengbu a été recueilli, placé dans un flacon de sérum contenant 50U/ml d'héparine dans des conditions aseptiques, stockées dans une glacière à 4 degrés et transportées vers les cellules. Dans la salle de culture, les cellules mononucléaires de sang de cordon ombilical ont été obtenues par centrifugation en gradient de densité. Les cellules mononucléaires obtenues ont été divisées en deux parties, et le milieu M199 de sérum de veau fœtal (FCS-M199) et le milieu M199 de sérum autologue (AS-M199) ont été ajoutés. Et ils ont été ensemencés dans des boîtes de culture avec et sans fibronectine humaine (HFN) (marquées comme : F(0), F(1), A(0), A(1)) respectivement. L'induction, la différenciation et l'expansion in vitro ont été réalisées.
Les changements morphologiques des cellules adhérentes au cours de l'ensemble du processus d'induction et de différenciation ont été observés, et ils ont été identifiés sous différents angles combinés avec des techniques connexes telles que l'immunohistochimie, l'immunofluorescence et la cytométrie en flux.
Résultats : Après 12 jours de culture, les cellules mononucléaires du sang de cordon ont commencé à adhérer. Après 3d, la forme fusiforme a commencé à apparaître, puis le nombre de cellules adhérentes a progressivement augmenté et est progressivement devenu fusiforme. Lorsqu'elle est cultivée jusqu'à une semaine, une colonie typique se forme avec des cellules fusiformes autour et des cellules rondes au centre. Lorsque les cellules ont été cultivées pendant 14 jours, les grappes de cellules interconnectées se sont progressivement connectées et ont formé une structure en forme de réseau. Dans le même temps, avec l'augmentation continue du temps de culture, les longues cellules fusiformes ont également commencé à se raccourcir progressivement et ont montré un changement typique en forme de pavé.
Les cellules adhérentes ont été cultivées pendant une semaine et il a été observé que le nombre de cellules dans le milieu avec de la fibronectine humaine était significativement plus élevé que celui sans fibronectine humaine, et il n'y avait pas de changement significatif du nombre de cellules dans les deux milieux différents. #Consommables pour instruments#