La mise en forme cellulaire implique les étapes d'injection, de mise en forme et d'obtention de cellules. Les cellules dans le flacon de culture cellulaire doivent croître et se développer dans une certaine mesure. A ce moment, il est nécessaire de s'appuyer sur la trypsine pour digérer les cellules sur la paroi externe du flacon puis la palper. Dans le cas des enzymes, le temps de digestion doit être contrôlé.
Flacon de culture cellulaire T75
La trypsine appartient à une classe différente de trypsine, qui peut dégrader les protéines sur les membranes cellulaires fusionnées aux flacons de culture cellulaire. En dissolvant la protéine sur la partie correspondante, la protéine à la jonction entre les protéines est dissoute et la cellule devient sphérique en raison de la force de soutien du cadre cellulaire de sa propre structure interne, séparant ainsi les cellules. Le niveau de digestion de la trypsine est un facteur clé dans la mise en forme des cellules : une digestion excessive augmente les débris cellulaires, les débris noirs augmentent, les cellules tomberont dans leur ensemble, compromettant gravement la viabilité des cellules, et certaines cellules flottent, avec le flux de trypsine rejeté ; si la digestion ne suffit pas, il est difficile pour les cellules d'être soufflées de la paroi interne de la bouteille, et le soufflage et le battement continus endommageront également l'activité cellulaire.
flacon de culture cellulaire
Flacon de solution de culture de protéines sériques
Dans différentes institutions ou cellules, l'effet des enzymes pancréatiques n'est pas le même. L'activité des cellules dispersées de l'enzyme pancréatique est également liée à sa valeur de concentration, sa température et sa durée d'effet. Lorsque le pH est de 8.0 et que la température est de 37, le niveau d'efficacité de la solution aqueuse d'enzymes pancréatiques est relativement fort. Lors de l'application de trypsine, la concentration, la température et la durée doivent être bien contrôlées pour éviter les dommages cellulaires causés par une digestion excessive. Parce que Ca2, Mg2 et les protéines sériques, les grammes de protéines réduisent l'activité de la pancréatine, donc lors de la préparation d'une solution aqueuse de pancréatine, utilisez du BSS sans Ca2, Mg2, tel que : solution D-Hanks. Lors de l'arrêt de la digestion, la trypsine peut être arrêtée avec un milieu de culture cellulaire de protéines sériques ou un retardateur de trypsine pour arrêter l'effet de la trypsine sur les cellules.
flacon de culture
Flacon de culture cellulaire T25
De plus, s'il s'agit d'une cellule nouvellement achetée, vous pouvez utiliser une concentration inférieure de trypsine pour explorer d'abord le temps de digestion et observer si les cellules deviennent rondes à chaque minute et faire un bon enregistrement. Au total, lors de l'obtention des cellules dans le flacon de culture cellulaire, il est nécessaire de maîtriser le temps de trypsinisation, afin de maintenir efficacement la viabilité des cellules.