Comme le dit le proverbe, si un ouvrier veut faire du bon travail, il doit d'abord affûter ses outils. Le choix des consommables est très important pour obtenir des résultats d'expérience PCR satisfaisants. Lors de l'analyse des résultats de la PCR, nous nous concentrons souvent sur l'analyse des amorces, la concentration en enzyme, la température et le temps, mais ignorons que les consommables de la PCR sont également l'un des facteurs d'influence. Il existe de nombreux types de consommables PCR, comment choisir les bons consommables PCR ? Voici quelques questions pour vous aider à trouver votre réponse.
consommables pcr
1. Pourquoi les consommables PCR sont-ils généralement en PP ?
Qu'il s'agisse d'une PCR ordinaire ou d'une PCR quantitative par fluorescence en temps réel (qPCR), ses consommables seront généralement en contact direct avec des réactifs ou des échantillons, de sorte que des matériaux de haute qualité et de bonnes techniques de traitement sont nécessaires dans le processus de production et de préparation. Les consommables généraux sont en polypropylène (PP). Le polypropylène (PP) est un matériau biologiquement inerte, la surface n'adhère pas facilement aux biomolécules et présente une bonne résistance chimique et une bonne tolérance à la température.
2. Comment choisir des tubes/plaques PCR de volumes différents ?
Volumes communs pour tubes/plaques PCR :
• Tube unique/{{0}}tube/12-tube : 00,5 mL, 00,2 mL, 0,1 mL
• {{0}}plaque à puits : 0.2 mL, 0,1 mL
• {{0}}plaque à puits : 0,02 mL
Spécifications des tubes/plaques PCR :
Sélectionnez le produit approprié en fonction des exigences expérimentales spécifiques. Le volume de la plupart des tubes PCR peut répondre aux exigences des réactions PCR. Les spécifications de capacité sont disponibles en capacité standard et en faible capacité. Généralement, il est recommandé de choisir d'abord des tubes de faible capacité. Parce que les tubes/plaques du réacteur à faible volume ont moins de marge, le transfert de chaleur est amélioré et l'évaporation est réduite. En même temps, il est nécessaire d'éviter d'ajouter trop ou trop peu d'échantillon lors de l'ajout d'échantillons. Une trop grande quantité peut entraîner une diminution de la conductivité thermique, des déversements et une contamination croisée, tandis qu'une quantité insuffisante peut entraîner une perte d'évaporation de l'échantillon.
3. Quelle est la différence entre le couvercle plat/couvercle convexe d'un tube simple ou d'un 8-tube de rangée ?
Lorsque le volume d'échantillon est petit, les tubes à tube unique ou {{0}}tubes sont préférés. Cependant, lorsque le volume de réaction requis est important, les tubes simples prévalent et le volume peut atteindre 0,5 ml. Il existe deux types de tube simple et de tube 8- avec couvercle plat et couvercle convexe, chacun ayant ses propres avantages. Le capuchon plat fournit une livraison précise du signal fluorescent pour la qPCR ; facile à écrire sur les marqueurs. Le couvercle convexe est en contact avec le couvercle de l'instrument PCR pour réduire la déformation du tube causée par la pression ; cependant, cela affectera la transmission des signaux fluorescents et ne peut pas être appliqué aux expériences de qPCR.
4. Quelles sont les différences dans les scénarios d'utilisation des différentes 96-plaques à puits ?
96-Les plaques à puits sont généralement divisées en plaques sans jupe, plaques à demi-jupe et plaques à jupe complète.
Plaques sans jupe : compatibles avec la plupart des thermocycleurs ou des machines qPCR, mais ne conviennent pas aux applications automatisées. La stabilité n'est pas élevée pendant le processus de pipetage et doit être utilisée avec un support de plaque.
Plaque semi-jupe : Elle peut être adaptée pour étiqueter ou appliquer un code-barres, et une application automatique, et a une bonne stabilité au pipetage.
Plaque à jupe pleine : très adaptée aux applications de laboratoire automatisées, mais également adaptée aux applications d'étiquettes et de codes-barres. Bonne résistance mécanique, adaptée aux machines PCR avec modules saillants, et grande stabilité lors du pipetage.
5. Le matériau de la plaque/du tube PCR est-il plus épais et plus stable ?
Non. Les consommables PCR doivent avoir une épaisseur de paroi uniforme pour assurer un transfert de chaleur constant. La paroi du tube ultra-mince est 50 % plus fine que la version standard, ce qui peut encore réduire la barrière thermique, ce qui se traduit par une réponse plus rapide et meilleure.
6. Pour les plaques 96-puits ou 384-puits, pourquoi les coins coupés et les étiquettes ne sont-ils pas les mêmes ?
Coupe en coin : Le choix de la position de coupe en coin de la plaque PCR dépend des exigences de l'instrument adapté pour un positionnement facile.
Identification : Les marquages alphanumériques sur les plaques PCR aident à identifier les puits individuels et les emplacements des échantillons. Généralement, il s'agit d'un logo numéroté en relief ou d'un logo gravé. Pour certaines expériences d'application automatisées, la plaque de réaction avec des marques imprimées sera mieux scellée.
7. Certains puits de la plaque PCR dépassent, tandis que d'autres sont plats. Quel est le meilleur?
Ce qui convient est bon. Les plaques PCR courantes ont deux types : les bords de puits plats et les bords de puits surélevés. Plaque de réaction avec bord de puits plat, adaptée à la plupart des thermocycleurs. La plaque de réaction sur le bord du trou de la colonne montante est pratique pour le scellement, ce qui peut réduire le risque de contamination croisée entre les échantillons.
8. Comment choisir des tubes/plaques PCR de différentes couleurs ?
Pour les réactions PCR ordinaires, des réactions transparentes peuvent être utilisées. Dans la réaction PCR en temps réel, la sensibilité et la consistance du tube blanc sont relativement plus élevées. Les parois blanches du tube empêchent la fluorescence de passer à travers les parois du tube et la réfraction, empêchant ainsi la fluorescence de passer vers le module de chauffage, d'être absorbée par le module ou de se refléter de manière incohérente. Par rapport aux tubes transparents, des signaux de fluorescence plus forts et plus focalisés peuvent être collectés au sommet des tubes blancs.
