Façons d'éviter la contamination cellulaire : conseils de pipetage que vous devez connaître
Parmi les nombreuses variables contrôlées en culture cellulaire, une variable spécifique affecte l'ensemble de l'expérience : la contamination. Un facteur contribuant à la contamination cellulaire n'est pas toujours sur le radar, et bien qu'il puisse affecter silencieusement la santé des cellules et affecter les données de mesure, c'est la contamination par pipetage.
Le choix des pipettes, des embouts de pipette et des programmes de pipetage reçoit peu d'attention lors de la conception des expériences. Même une solution de couverture (autoclavage) pour éviter la contamination par pipetage peut ne pas être aussi efficace qu'on le croit généralement.
La première règle de la culture cellulaire : éviter la contamination. Pourquoi la technique stérile est-elle si importante pour une culture cellulaire réussie ?
La technique aseptique est le seul moyen d'obtenir des résultats fiables et reproductibles. La pollution peut affecter la croissance cellulaire, le métabolisme et la santé -- quelque chose que les scientifiques sont intéressés à étudier. Les lignées cellulaires contaminées n'ont pas les propriétés souhaitées et fonctionnent différemment à chaque fois, en fonction de la gravité de la contamination. De plus, si des contaminants envahissent vos cellules d'intérêt, vous risquez d'étudier le mauvais organisme.
Quels types de polluants les scientifiques rencontrent-ils souvent ?
Les sources courantes de contamination sont les bactéries, les levures et les moisissures. Dans les travaux de culture cellulaire, le plus difficile à détecter et à éradiquer est le mycoplasme. Les types de contamination moins courants incluent, par exemple, les matières lixiviables en plastique dans les consommables de laboratoire.
Quelles sont les causes courantes de contamination cellulaire ?
Une source courante de contamination est un mauvais pipetage, comme l'utilisation de pipettes contaminées et de pointes sans filtre. En outre, le manque de bonnes pratiques de laboratoire, telles qu'une décontamination inadéquate des instruments tels que les incubateurs ou les hottes à flux laminaire, est également un problème. Pour éliminer les mycoplasmes, une filtration est nécessaire à l'aide d'un filtre 0.1 µm au lieu d'un filtre 0.2 µm.
Trois contaminations de pipetage :
1. Contamination de la pipette à l'échantillon : la pipette ou l'embout de la pipette contamine l'échantillon.
Comment éviter:
Utilisez des pointes à filtre stériles pour éviter la contamination du corps de la pipette.
Changer la pointe de la pipette après chaque échantillon.
Autoclavez ou stérilisez régulièrement les pipettes avec de l'éthanol. Choisissez une pipette compatible avec l'autoclave.
2. Contamination de l'échantillon à la pipette : Le pipetage de l'échantillon dans le corps de la pipette contamine la pipette.
Comment éviter:
Utilisez des pointes à filtre ou des pointes à déplacement positif pour empêcher les échantillons de pénétrer dans le corps de la pipette.
Lors du pipetage, maintenir la pipette en position verticale. Conservez la pipette à la verticale.
Inclinez le flacon lors du pipetage.
Relâchez lentement le bouton pour éviter d'éclabousser l'échantillon dans la pipette. Choisissez une pipette équipée d'une fonction d'éjection douce.
3. Contamination inter-échantillons : les échantillons de pipetage résiduels sont transférés vers l'échantillon suivant. Se produit généralement lorsque le même embout est utilisé plusieurs fois.
Comment éviter:
Changer la pointe de la pipette après chaque échantillon.
Utilisez des pointes à filtre ou des pointes à déplacement positif pour empêcher l'échantillon d'entrer dans le corps de la pipette et sur l'échantillon suivant.
Assurez-vous que la pointe de la pipette est scellée sur la pipette pour éviter les fuites d'échantillon. Par exemple, la pointe de Yongyue Medical.
Existe-t-il des facteurs de contamination dont les scientifiques ne sont peut-être même pas conscients ?
L'efficacité de l'autoclavage n'est souvent pas vérifiée, et si l'autoclave ne fonctionne pas correctement, les embouts de pipette autoclavés peuvent ne pas être stériles. Les filtres pré-stérilisés emballés dans un emballage protecteur sont l'option la plus sûre pour prévenir de tels accidents. Le processus de pré-stérilisation des pointes de pipette de haute qualité est régulièrement validé pour garantir l'efficacité de la pré-stérilisation.
Comment les outils de pipetage et de distribution facilitent-ils la manipulation des échantillons dans un environnement stérile pour les scientifiques ?
Choisir les bonnes pipettes et embouts de pipette peut faciliter le flux de travail aseptique. Les pipettes médicales Yongyue sont faciles à nettoyer et à ouvrir sans outils, ce qui accélère le nettoyage quotidien. L'autoclavage étant plus efficace pour éliminer la contamination que les lingettes à l'éthanol, les pipettes mécaniques Sartorius sont entièrement autoclavables, ce qui signifie que vous pouvez décontaminer vos pipettes de manière fiable. L'éjection douce de la pointe évite le risque potentiel de contamination par des éclaboussures lors de l'éjection de la pointe. Les pointes de filtre pré-stérilisées protègent vos échantillons contre la contamination croisée. Les embouts médicaux Yongyue sont également emballés dans un emballage étanche, ce qui signifie que toute contamination dans les conditions de stockage et de livraison n'entrera pas en contact avec les embouts ou la boîte à embouts.
Comment les scientifiques peuvent-ils éviter la pollution ? Quels sont vos meilleurs conseils pour le travail stérile ?
Tout d'abord, de bonnes pratiques de laboratoire et une planification minutieuse des étapes de travail. Assurez-vous de ne conserver que ce qui est nécessaire pour un flux de travail spécifique dans la hotte à flux laminaire et d'utiliser une culture cellulaire en même temps. De plus, des tests réguliers pour les contaminants comme les mycoplasmes vous donnent la tranquillité d'esprit et la confiance dans vos résultats. Lorsque vous travaillez dans des conditions stériles, l'argent dépensé pour les pointes de filtre pré-stérilisées et les réactifs stériles en vaut la peine.