Quelle est la signification de la détection d'acide nucléique par PCR, méthodes et étapes
Les tests d'acide nucléique sont actuellement un moyen efficace de déterminer si le virus est porteur du nouveau coronavirus. À l'heure actuelle, les gens utilisent principalement des écouvillons nasaux, des écouvillons de gorge et des sérums d'anticorps lgm comme référence. Mais selon les dernières exigences d'entrée de Singapour, des tests d'acides nucléiques par PCR sont effectués, alors que signifient les tests d'acides nucléiques par PCR ?
Quelle est la signification de la détection d'acide nucléique par PCR
PCR signifie réaction en chaîne par polymérase, qui peut être utilisée pour amplifier l'ADN, de manière à amplifier une petite quantité d'ADN dans la mesure où elle peut être détectée. L'acide nucléique de certains virus est l'ADN, et cette méthode doit être utilisée pour la détection. Par conséquent, la PCR n'est pas un contrôle effectué, mais une méthode de détection de l'ADN. Par exemple, la quantification de l'ADN du virus de l'hépatite B utilise cette méthode. Le but de l'inspection ADN est de diagnostiquer la maladie d'une part. Si même l'ADN de l'agent pathogène peut être détecté, cela signifie que l'agent pathogène est infecté ; d'autre part, il s'agit de juger dans quelle mesure le virus s'est répliqué, afin de juger de la gravité de la maladie ou de l'effet du traitement.
Méthodes et étapes de détection d'acide nucléique par PCR
Les tests d'acides nucléiques nécessitent cinq étapes : échantillonnage, rétention d'échantillon, rétention, extraction d'acide nucléique et test informatique.
La première étape de la détection des acides nucléiques consiste à collecter les sécrétions humaines et à essuyer la cavité nasale ou la paroi arrière du pharynx et les amygdales pharyngées bilatérales avec un test nasal ou un test pharyngé.
Dans la deuxième étape, le personnel médical a conservé l'échantillon, a immergé la tête de l'éprouvette dans la solution de conservation des cellules et a vissé le bouchon du tube immédiatement après avoir cassé la queue.
Dans la troisième partie, mettez l'échantillon dans un sac hermétique, conservez-le et envoyez-le pour inspection à temps.
La quatrième étape consiste à envoyer l'échantillon au laboratoire pour en extraire l'acide nucléique.
Dans la cinquième étape, l'extrait est soumis à une réaction d'amplification par PCR fluorescente.
Qu'est-ce que l'acide nucléique
L'acide nucléique (acide nucléique) est un type de macromolécule biologique composée de nucléotides (nucléotide), divisés en acide ribonucléique (ARN) et acide désoxyribonucléique (ADN), dans lequel l'ARN est principalement une structure à chaîne unique, l'ADN est principalement une structure double brin. En plus du prion, l'acide nucléique est une macromolécule biologique nécessaire à la vie. Sa fonction principale est de constituer le support d'information génétique de la vie. De plus, certains acides nucléiques peuvent être utilisés comme et participer à la formation d'enzymes biologiquement actives. Molécules ou autres machines moléculaires.
Qu'est-ce que le test d'acide nucléique
La détection des acides nucléiques, comme son nom l'indique, consiste à détecter les acides nucléiques.
Quels sont les avantages uniques des tests d'acide nucléique? Pourquoi peut-il être utilisé comme"gold standard" pour le diagnostic du nouveau coronavirus ?
En fait, chaque méthode de détection a ses propres scénarios d'application. Prenant comme exemple la détection de virus, l'objet de détection des méthodes de détection immunologiques habituelles (or colloïdal, ELISA, chimiluminescence, etc.) est l'antigène ou l'anticorps du virus, ce qui équivaut à"side drawing". Étant donné qu'il existe une fenêtre temporelle entre l'infection et la détectabilité, les méthodes de détection immunologiques ne conviennent généralement pas pour un diagnostic précoce.
Quelle est la signification de la détection d'acide nucléique par PCR, méthodes et étapes
Faux positifs et faux négatifs
1. Faux positif
Il y a généralement moins de faux positifs. Généralement, le mauvais fonctionnement du personnel de laboratoire peut entraîner une contamination croisée entre les échantillons ou une contamination résiduelle des produits amplifiés. Dans ce cas, des faux positifs peuvent être provoqués.
Cependant, les faux positifs peuvent être efficacement contournés en contrôlant strictement le processus de détection et en mettant en œuvre une stratégie de participation aléatoire à la détection de plusieurs échantillons négatifs.
2. Faux négatif
Ce qu'il faut expliquer ici, c'est que les faux négatifs dans la détection par PCR et les faux négatifs cliniques ne sont en fait pas le même concept.
En prenant le diagnostic du nouveau coronavirus, qui est intensément discuté sur Internet, à titre d'exemple, les faux négatifs cliniques font référence aux cas où les symptômes cliniques et les études d'imagerie sont fortement suspectés d'être infectés, mais le test PCR est à plusieurs reprises ou toujours négatif ; et le test PCR faux négatif se réfère au collecté Il y a une quantité suffisante du nouveau coronavirus dans l'échantillon mais il n'a pas été détecté.
Pour éviter les faux négatifs dans les tests d'acide nucléique, les principaux besoins à résoudre sont : (1) il y a suffisamment de virus dans les cellules de la personne infectée, (2) les cellules contenant le virus peuvent être collectées dans l'échantillon collecté, et (3 ) le virus dans l'échantillon est détecté Ces trois liens.
Parmi eux, les paramètres techniques des kits PCR affectent principalement le troisième maillon de détection.
Uniquement pour le troisième lien de test, si le nombre de virus dans l'échantillon est inférieur à un certain niveau (inférieur à la limite minimale de détection), le kit PCR ne pourra pas le détecter. De ce point de vue, les faux négatifs dans la détection par PCR ne peuvent pas être complètement évités. C'est pourquoi il est nécessaire de compléter le développement des tests d'anticorps spécifiques du virus.